概述

體外重現(xiàn)組織屏障的滲透性對(duì)于評(píng)估化學(xué)物質(zhì)、藥物或化妝品等在上皮組織的選擇性轉(zhuǎn)運(yùn)至關(guān)重要。物質(zhì)對(duì)組織屏障的滲透能力影響它們的吸收和效果。因此，在制藥和化妝品行業(yè)，尤其是在毒理學(xué)研究中確定物質(zhì)的滲透性非常關(guān)鍵。

器官芯片技術(shù)是一門(mén)在建立體外屏障模型方面表現(xiàn)十分出色的新興技術(shù)。器官芯片的小型通道和腔室特性使多類(lèi)型細(xì)胞的培養(yǎng)和組織單元功能重建成為可能。BE-Transflow芯片允許對(duì)皮膚等上皮進(jìn)行氣液界面(ALI)培養(yǎng)，在進(jìn)行滲透性研究上提供了很大的便利。

BE-Transflow芯片進(jìn)行滲透性研究

在2023年的一項(xiàng)研究中，來(lái)自西班牙薩拉戈薩大學(xué)阿拉貢工程研究所組織微環(huán)境實(shí)驗(yàn)室的研究人員利用BE-Transflow芯片開(kāi)發(fā)了一種上皮芯片模型。研究人員通過(guò)在BE-Transflow芯片的培養(yǎng)井中培養(yǎng)永生化人角質(zhì)形成細(xì)胞系(HaCaT細(xì)胞)14天獲得了分層皮膚上皮。細(xì)胞在接種4天后，除去頂部的培養(yǎng)基以形成氣液界面并通過(guò)底部通道中循環(huán)的培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。通過(guò)鈣黃綠素染色評(píng)估形成的層的活力。蘇木精-伊紅染色顯示了BE-Transflow芯片中的分層上皮。通過(guò)免疫組化評(píng)估，細(xì)胞角蛋白-2、-10和-14的表達(dá)確認(rèn)了三個(gè)表皮層。

圖1 培養(yǎng)14天后HaCaT細(xì)胞的復(fù)層上皮。(A)蘇木精-伊紅染色。細(xì)胞角蛋白2(B)、細(xì)胞角蛋白10(C)和細(xì)胞角蛋白14(D)的免疫染色呈綠色。用DAPI(藍(lán)色)進(jìn)行細(xì)胞核染色。

下一步是評(píng)估芯片上皮模型是否可以確定不同分子的滲透系數(shù)。為此，研究人員對(duì)熒光素的滲透性進(jìn)行了4小時(shí)的評(píng)估，結(jié)果顯示滲透曲線(xiàn)呈線(xiàn)性斜率，這使得該分子的滲透性系數(shù)和獲得的值與人角膜內(nèi)皮中發(fā)現(xiàn)的值相似。此外，使用FITC標(biāo)記的不同分子量的葡聚糖對(duì)其滲透系數(shù)進(jìn)行定量分析。該模型能夠根據(jù)斯托克斯-愛(ài)因斯坦方程將化合物的斯托克斯半徑與其滲透系數(shù)關(guān)聯(lián)起來(lái)。該結(jié)果特別有價(jià)值，因?yàn)?/span>它允許通過(guò)確定分子的滲透系數(shù)來(lái)估計(jì)分子的斯托克斯半徑，反之亦然。

圖2 (A)每30分鐘至8小時(shí)超時(shí)定量熒光素滲透性(mol/m^?3x10³) (B)每10分鐘至4小時(shí)超時(shí)定量熒光素滲透性(mol/m^?3x10³) (C) 4000、10000、20000和40000 g/mol分子量 (mol/m^?3x10³)的異硫氰酸酯-葡聚糖(右旋糖酐)的熒光素滲透性，每30分鐘進(jìn)行一次定量，直至8小時(shí)。(D)根據(jù)量化滲透率計(jì)算出的滲透系數(shù)(m/sec)x10^?8與所研究的異硫氰酸熒光素-葡聚糖所描述的斯托克斯半徑的倒數(shù)((m?1)x109))之間的加權(quán)最小二乘擬合。

最后，研究人員使用芯片上皮模型通過(guò)滲透系數(shù)確定金納米顆粒的半徑。研究人員制備了不同尺寸的納米顆粒，并與之前的葡聚糖分子類(lèi)似地評(píng)估了它們的滲透系數(shù)。根據(jù)獲得的值，研究人員可以計(jì)算顆粒的斯托克斯半徑，其結(jié)果與透射電子顯微鏡獲得的值相似。

總體而言，本文展示了Be-Transflow裝置作為滲透性研究的芯片上皮平臺(tái)的重要作用，特別是在確定與分子或顆粒擴(kuò)散相關(guān)的斯托克斯半徑方面。該模型將其適用性擴(kuò)展到皮膚、腎、腸或肺等器官中發(fā)現(xiàn)的上皮細(xì)胞。

點(diǎn)成生物器官芯片解決方案

作為實(shí)驗(yàn)室儀器集成商，點(diǎn)成生物始終致力于為客戶(hù)提供先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備解決方案。點(diǎn)成生物作為器官芯片品牌BeonChip的中國(guó)代理商，為用戶(hù)提供了先進(jìn)的器官芯片設(shè)備，適用于各個(gè)器官的體外芯片模型構(gòu)建。如果您對(duì)點(diǎn)成生物器官芯片解決方案感興趣，歡迎與我們聯(lián)系。